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ELISA試劑盒酶標板關鍵有哪些
瀏覽次數:419發布日期:2021-12-30

我們根據ELISA試劑盒不同的分類標準,酶標板有著不同的分類。


一、根據孔數,ELISA試劑盒酶標板關鍵分類酶標板關鍵分類可分為96孔、48孔等,由于酶標板首要是協作酶標儀用,現在市面上的酶標儀有48孔和96孔,但酶標板常用的是96孔。


二、根據其底部的不同,又分為平底的,U型底、V型底等。平底的折射率低,適于在酶標儀檢測;U型底的酶標板折射率較高,便當加樣、吸樣、混勻等操作,可以不用放在酶標儀上,直接通過目測調查色彩改動狀況,然后斷定有無相應的免疫反應。V底的酶標板可以的汲取樣品。


三、根據酶標板與蛋白和其它分子結合才干的不同,又分為高結合力、中結合力和氨基化等。

1) 高結合力

此種酶標板,表面經處理后,其蛋白結合才干大大增強,可達300~400ng IgG/cm2,首要結合的蛋白分子量>10kD。運用該類酶標板可進步敏感性,并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易發生非特異性反應??乖蚩贵w包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位,需運用蛋白作為封閉劑。

(2) 中結合力

此類酶標板經表面疏水鍵與蛋白結合,適宜作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結合才干為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可下降潛在的非特異性穿插反應。該類板可以慵懶蛋白或非離子去污劑作為封閉液。

ELISA試劑盒實驗

(3)氨基化

ELISA試劑盒這種酶標板經表面改性處理后具有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由親水鍵代替。該類酶標板適宜作為小分子蛋白的固相載體。運用適宜的緩沖液和pH值,其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯劑共價結合的才干,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于下降了疏水性,一部分蛋白分子無法結合;此外,其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性,運用的封閉液有必要可以與非反應性氨基基團和所挑選的交聯劑中任何功用基團發生作用。


四、根據色彩可分為透明、黑色、白色。

透明的是常用的,用于一般的酶聯免疫實驗。相對于透明的的酶標板,還有用于發光檢測用的不透明的酶標板,一般有黑色和白色兩種。黑色的酶標板本身會有光吸收,所以它的信號相對于白色酶標板要低許多,因而一般用于檢測較強的光,如熒光檢測。而白色的酶標板就用于較弱的光檢測,常用于一般的化學發光。其他黑色的酶標板還可以消弱非特異反應帶來的問題。一同需求留意的是,用一般的酶標板不可以進行發光檢測,由于一般從化學發光反應中發射出的光是各向同性,如果用透明的酶標板,光不只會從筆直方向發散,還會從水平方向發散,使得光極易通過各個孔之間的空地和孔壁,然后導致各孔的光吸收值遭到相鄰孔發射光的影響。

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